Albendazol 251

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Braz J Med Biol Res vol.40 no.10 Ribeiro Preto Oct. 2007 Epub 14 ago 2007 http://dx. doi. org/10.1590/S0100-879X2006005000167~~number=plural Braz J Med Biol Res 2007, 40: 1403-1408. Efectos terapéuticos de alcaloides moorcroftiana Sophora en combinación con albendazol en ratones infectados experimentalmente con protoescólices de Echinococcus granulosus X. M. Ma 1,2. G. SH. Bao 2. J. M. Wan 3. D. J. Liao 4. SH. F. Yin 2. X. Q. Meng 1. G. K. Zhou 1. X. M. Lu 5 y H. Y. Li 1 1 Facultad de Ciencias de la Vida, 2 Escuela de Medicina Básica, Universidad de Lanzhou, Lanzhou, Gansu, República Popular de China 3 Departamento de Farmacología, 4 Departamento de Patología, Wayne Facultad de Medicina, Detroit, MI, EE. UU. 5 Lanzhou Tongjian compañía de biotecnología en la Universidad del Estado , Lanzhou, Gansu, República Popular de china el objetivo del presente estudio fue determinar si la combinación de alcaloides a partir de semillas de Sophora moorcroftiana y albendazol podría ser eficaz en el tratamiento de la equinococosis experimental en ratones NIH hembra (6 semanas de edad y un peso de 18-20 g , N 8 en cada grupo) infectados con protoescólices de Echinococcus granulosus. protoescólices viables (N 6 x 10 3) se cultivaron in vitro en 1640 y la mortalidad se calculó diariamente. Para determinar la eficacia in vivo, los ratones fueron inoculados por vía intraperitoneal con protoescólices viables y después se trataron una vez al día por sonda durante tres meses con los alcaloides (50 mg kg -1 día -1) y albendazol (50 mg kg-1 día-1), por separado y en combinación (ambos alcaloides en 25 mg kg -1 día -1 y albendazol a 25 mg kg-1 día-1). A continuación, los quistes hidatídicos recogidos de la cavidad peritoneal de los animales se pesaron y se analizaron el suero de IL-4, IL-2, y los niveles de IgE. La administración de alcaloides a protoescólices cultivadas mostró la dosis y efectos asesinos dependiente del tiempo significativo. El peso de los quistes hidatídicos se redujo significativamente después del tratamiento con cada fármaco (P 0,01). Estos resultados indican que S. moorcroftiana alcaloides tener efectos escólices y la combinación de alcaloides y albendazol tiene efectos significativos aditivos. Palabras clave: Sophora moorcroftiana. Echinococcus granulosus. Alcaloides, citoquinas, Etnobotánica, Terapéutica Sophora moorcroftiana (Wall.) Es un arbusto medicinal popular endémica de los amplios valles y el curso medio de varios afluentes principales del río Yalu Tsangbo (Nianchu y Lhasa Ríos) en el Tíbet, China. La decocción de las semillas se utiliza en la medicina popular china como un antiflogístico, desintoxicante, emético, y en parasitosis. Nueve gramos de semillas secas, cocidas en agua, se utiliza comúnmente en la medicina popular para tratar parasitosis (1,2). Clínicamente, la equinococosis se trata más comúnmente con albendazol. Sin embargo, el albendazol no se absorbe bien en el tracto intestinal y por lo tanto su concentración hepática es baja, lo que reduce su eficacia ya que el hígado es uno de los órganos más afectados por la equinococosis. Los pacientes con equinococosis tomar albendazol pueden tener reacciones adversas graves como el síndrome de encefalitis, síndrome gripal, púrpura alérgica, erupción cutánea, etc., y el tratamiento no es rentable. Por otra parte la resistencia, protoescólices Echinococcus granulosus se han desarrollado hasta el albendazol (3-7). Por lo tanto, la búsqueda de nuevas drogas continúa. En el presente estudio, se investigó la eficacia de los alcaloides extraídos de las semillas moorcroftiana S., solo y en combinación con albendazol, contra protoescólices cultivadas y en el tratamiento de los ratones infectados experimentalmente con protoescólices de Echinococcus granulosus. Los resultados mostraron que los alcaloides de las semillas moorcroftiana S. combinados con albendazol fueron muy eficaces contra la equinococosis experimental. Alcaloides (pureza superior al 90) fueron extraídos de semillas de S. moorcroftiana en nuestro laboratorio como se describe previamente (8). El albendazol se adquirió de Zhejiang Wanma Pharma Co. Ltd. Hangzhou, China. MTT (bromuro de 3- 2,5-difeniltetrazolio), dimetilsulfóxido (MEB 2B SO), y el medio RPMI 1640 se obtuvieron de China y Estados Unidos Biotecnología Co. Shanghai, China, y el kit de radioinmunoensayo interleuquina 4 (IL-4) fue de ejército del hospital general del Centro de Tecnología, Beijing, china. IL-2 radioinmunoensayo y kits de ensayo inmunorradiométrica IgE fueron adquiridos de Beijing Instituto de Biotecnología del Norte, Beijing, China. S. alcaloides moorcroftiana y albendazol se diluyeron con 0,1 MeB 2B SO para obtener los niveles deseados de concentración. colección protoescólex e in vitro protoescólices Echinococcus granulosus estudio fueron removidos asépticamente de quiste hidatídico hepático obtenidos de ovejas en el matadero municipal en la provincia de Qinghai, China. Los protoescólices se lavaron varias veces con solución salina que contiene 100 kU / L bencilpenicilina y 100 mg / L de estreptomicina como se ha descrito en la literatura (9). La tasa de supervivencia de los protoescólices superó el 95 después de estos procedimientos. Como se ha descrito previamente (7), 6 x 10 3 protoescólices viables se cultivaron en 5 ml de RPMI 1640 suplementado con 100 kU / L bencilpenicilina y 100 mg / L de estreptomicina. Se añadieron los alcaloides (0,75 a 6,0 g / L) y albendazol (T20 Tmg / L) por separado a las 24 h. Protoescólices cultivaron en un medio que contiene 0,1 Me 2 SO sirvió como control. Durante las incubaciones, la mortalidad se calcula a diario por el azul de metileno prueba de exclusión del colorante (10). El experimento se repitió tres veces. ratones NIH hembras endogámicas normales fueron adquiridos de Lanzhou Instituto de Productos Biológicos, Ministerio de Salud de China, la ciudad de Lanzhou, China. A las 6 semanas de edad (18-20 g de peso corporal), los ratones se inocularon por vía intraperitoneal con 2 x 10 3 protoescólices viables en 0,5 ml de medio RPMI 1640 (11). Los animales fueron alojados en condiciones estándar con acceso libre a comida y agua. Después de 30 días (12), los ratones infectados se dividieron en cuatro grupos de 8 ratones cada uno, y un grupo de 8 ratones no infectados se incluyó como control. Todos los ratones fueron tratados mediante sonda intragástrica con los alcaloides de 50 mg kg -1 día -1. con albendazol a 50 mg kg -1 día -1. y con los dos alcaloides (25 mg kg -1 día -1) y albendazol (25 mg kg-1 día-1), o con el mismo volumen de agua destilada que contiene 0,1 Me2SO como el control del vehículo. Después de los tratamientos de 3 meses, los ratones infectados fueron anestesiados con pentobarbital sódico según las directrices institucionales, las muestras de sangre se recogieron del seno ocular, y los quistes hidatídicos se recogieron de la cavidad peritoneal. El peso de los quiste hidatídico se midió inmediatamente para examinar el crecimiento de las larvas y la tasa de inhibición se calculó como se describe en la literatura (13). Los quistes hidatídicos se cortaron en trozos de aproximadamente 1 mm 3. fijados en glutaraldehído y 3 1 tetróxido de osmio, se deshidrataron en alcohol graduado, y se embebieron en resina epoxi. Ultrathin secciones fueron doble teñidas con acetato de citrato de plomo / uranilo antes de ser examinada con un microscopio JEM-100CX electrónico de transmisión (JEOL Ltd. Tokio, Japón) (14). Serum IL-4 y IL-2 se midieron usando los anticuerpos monoclonales por radioinmunoensayo y la IgE total se midió usando anticuerpos monoclonales mediante un ensayo inmunoradiométrico para la determinación de la eficacia terapéutica. variaciones intra-ensayo fueron 5 para IgE, 8 para la IL-4, y 10 para la IL-2. variaciones interensayo fueron 10 para IgE y 15 para la IL-4 y IL-2. Todos los ensayos se realizan al mismo tiempo. Los datos se presentan como medios SD. La significación estadística se determinó mediante un modelo lineal utilizando el paquete estadístico para las Ciencias Sociales, versión 10.0 para Windows (SPSS Inc., Chicago, IL, EE. UU.). En la eficacia del tratamiento in vitro La mortalidad de E. granulosus protoescólices después de la exposición a diferentes concentraciones de alcaloides en la cultura se muestra en la Tabla 1. Aunque los protoescólices no tratados mostraron un aumento de la mortalidad después de un período de cultivo más largo, la mortalidad fue solamente 29,1 por día 7. El tratamiento con alcaloides indujo una mortalidad significativamente mayor que aumentó con el periodo de tratamiento de dosis y, llegando a 100 cuando se les dio alcaloides a 6 g / L para 7 días. La eficacia a la dosis más baja (0,75 g / L) fue mejor que la de albendazol administrado solo.